麻类生物工程进展_李宗道 张福泉 郑思乡_中国农业出版社,1999.10
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书名:麻类生物工程进展
作者:李宗道 张福泉 郑思乡
ISBN:7-109-06022-5
出版社:中国农业出版社
出版日期:1999.10
外源基因导入在植物遗传工程研究中,应用最为广泛的是通过农杆菌介导的基因转移系统。 据统计,目前已有60多种植物获得了转基因植物,其中80%以上是由农杆菌介导转移成功的。 苎麻是我国特产和重要出口创汇作物,目前通过传统的杂交育种方法选育出一个优良品种至少需要十多年,致使新选育出来的优良苎麻品种寥寥无几。 陈德富、李宗道等(1996,湖南农业大学苎麻研究所)进行了苎麻基因导入研究,为将来开展苎麻目的基因工程育种提供技术基础和理论基础。 一、材料与方法1.苎麻试管苗叶片的获取苎麻品种材料为“湘苎三号”。 采用常规种子消毒及无菌发芽方法。 接种地上部到附加0.05mg/L的1/2MS培养基上,30d后即可形成试管苗,取顶部三片叶为试验用叶片,叶片切成1cm×1cm大小。 2.菌株及培养(1)根癌农杆菌C58C1(pBz6111)该菌携带一个改建过的Ti质粒,切除了3T—DNA上的致癌基因,仅存在编码异戊烯基转移酶基因,即基因4.kmr。 培养方法为附加25mg/Lkm的YEP1213固体培养基(酵母膏10g/L,牛肉膏5g/L,蔗糖5g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,琼脂1.2%,pH7.0~7.2)。
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